培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人乳腺癌組織源細胞 |
英文名稱 | HumanCancer:Thyroid CancerTissuesCells |
貨號 | CS-X3523 |
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
0.094ng/ml人補體片斷3a(C3a)ELISA試盒pUNO1-mTNFAIP3
0.094ng/ml人補體因子D(CFD)ELISA試盒pUNO1-mTNFAIP6
0.938ng/ml人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA試盒 pUNO1-mTNFAIP8a
0.188ng/ml 人補體7(C7)ELISA試盒pUNO1-mTNFAIP8b
37.5pg/ml人補體蛋白4(C4)ELISA試盒pUNO1-mTNFRSF10B
7.5pg/ml人補體蛋白3(C3)ELISA試盒 pUNO1-mTNFRSF11A
46.9pg/ml人補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試盒 pUNO1-mTNFRSF11B
0.113ng/ml人補體1q(C1q)ELISA試盒pUNO1-mTNFRSF13B
46.875pg/ml人補體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試盒 pUNO1-mTNFRSF14
0.938ng/ml人普通急性淋巴細胞白病抗原(CALLA)ELISA試盒 pUNO1-mTNFRSF17
人乳腺癌組織源細胞載脂蛋白L4(APOL4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2,3-雙(2,4,5-三基-3-噻吩基)馬來酰亞胺
Collybistin蛋白(CB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)順-1,2-二基-1,2-雙(2,4,5-三基-3-噻吩基)烯(>98.0%(N))
Epiprofin蛋白(Epfn)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,2-雙[2-基苯并[b]噻吩-3-基]-3,3,4,4,5,5-六氟-1-環(huán)戊烯(>97.0%(GC))
含區(qū)PHD指蛋白1(BRPF1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,2-雙(2,4-二基-5-苯基-3-噻吩基)-3,3,4,4,5,5-六氟-1-環(huán)戊烯(>98.0%(HPLC))
輔激活因子激活因子(COAA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-(2-羥基)-3,3-二基吲哚啉-6'-硝基苯并螺吡喃(>93.0%(HPLC)(T))
含PR域蛋白10(PRDM10)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)螺[1,3,3-三基吲哚苯并二吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T))
睪素3(TIC3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,3,3-三基吲哚-6'-硝基苯并二吡喃并螺 [光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T))
鈣蛋白酶12(CAPN12)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)螺[1,3,3-三基吲哚-(6'-苯并二吡喃)][光致變色化合物](>98.0%(T))
Fruitless蛋白(FRU)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)螺[1,3,3-三基吲哚-(8'-氧基苯并二吡喃)][光致變色化合物](>98.0%(T))
Heterotaxy 1蛋白(HTX1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,3,3-三基吲哚-β-萘基二呋喃[光致變色化合物](>98.0%(T))
木糖酶同源物(XYLB)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,3,3-三基吲哚-奈諤嗪(>98.0%(HPLC)(T))
嗅蛋白(Olfactorin)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1'-雙(2,4-二硝基苯基)-4,4'-二氯化聯(lián)吡啶(>97.0%(HPLC))
Meichroacidin蛋白(MCA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1'-二基-4,4'-聯(lián)吡啶鎓鹽二氯化物水合物(>98.0%(HPLC)(T))
RIO激酶3(RIOK3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1'-二庚基-4,4'-二化聯(lián)吡啶鎓(>98.0%(HPLC)(T))
絲氨/蘇氨激酶25(STK25)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1'-二正辛基-4,4'-聯(lián)二化吡啶嗡(>98.0%(T))
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